X.400 ist eines der meistgenutzten Übertragungsprotokolle für EDI-Nachrichten. Die Übertragung erfolgt ähnlich wie bei einer E-Mail, allerdings nicht über das Internet, sondern über die eigenen Mailboxen mit eindeutigen X.400 Adressen innerhalb des X.400 Netzwerks des Betreibers. Dabei sind alle Nutzer anhand der X.400 Adresse eindeutig identifizierbar, was diesen Standard besonders bei der Übertragung von hochsensiblen Daten beliebt macht.
In Deutschland agiert die Deutsche Telekom als X.400-Provider, bekannt unter dem Namen BusinessMail X.400. In Vergleich zu anderen Übertragungsprotokollen wie AS2 ist der Austausch der Daten über X.400 kostenintensiver. Neben einer Grundgebühr verlangen die Provider auch Kosten für die Übermittlung von Nachrichten, abhängig von Dateigröße, Häufigkeit der Synchronisation von Mailboxen etc.
